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親和素
由蛋清中提取的糖蛋白
現(xiàn)在使用更多的是從鏈霉菌中提取的鏈親和素（streptavidin）。生物素（biotin）又稱維生素H，分子量244.31，存在于蛋黃中。用化學方法制成的衍生物，生物素－羥基琥珀亞胺酯（biotin-hydroxysuccinimide，BNHS）可與蛋白質、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素化的產(chǎn)物。親和素與生物素的結合，雖不屬免疫反應，但特異性強，親和力大，兩者一經(jīng)結合就極為穩(wěn)定。由于1個親和素分子有4個生物素分子的結合位置，可以連接更多的生物素化的分子，形成一種類似晶格的復合體。因此把親和素和生物素與ELISA偶聯(lián)起來，就可大提高ELISA的敏感度。
含義
親和素是一種糖蛋白，可由蛋清中提取。分子量60kD，由于每個分子由4個亞基組成，因此可以和4個生物素分子親密結合。在免疫機制有起重要作用！
類型
親和素主要包括卵白親和素、鏈親和素、卵黃親和素及類親和素等。后兩種因其特異性親和力低，研究不多，前兩種目前已深入研究并得到廣泛應用。
鏈霉
鏈霉親和素(SA)是與親和素(A)有類似生物學特性的一種蛋白質。是由Streptomyces avidin菌在培養(yǎng)過程中分泌的一種蛋白質產(chǎn)物，SA也可通過基因工程手段生產(chǎn)。SA分子量為65000，由4條序列相同的肽鏈構成，每條SA肽鏈可以結合1個生物素分子。因此與A一樣，每個SA分子也具有4個可與生物素分子結合位點，其結合常數(shù)與A相同為1015mol/L。約為抗原抗體間ka（105～1011 mol/L)的1萬倍以上。
SA與A的ka雖然相同，但在實際應用中其檢測靈敏度明顯優(yōu)于A，其原因是SA為 略偏酸性的蛋白。SA的每條肽鏈含159個氨基酸殘基，其中賴氨酸、精氨酸等堿性氨基酸的含量比一般親合素少，反之含酸性氨基酸較多，其等點為6.0，較A（pI=10）為低，同時在結構中SA不含任何糖基，而A含糖可高達10%。A的高pI及高含糖結構導致在聚苯乙烯板和硝酸纖維素膜上或與組織細胞DNA結合時，易產(chǎn)生一定程度的非特異性結合，造成較高的顯色背景，而SA較A在應用中明顯克服了這一缺點。
SA最高的活性可達18u,較A高（15u）；與A一樣，每個SA分子也具有4個可與生物素分子結合位點，故其效應相同。
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