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移液器
用于定量轉(zhuǎn)移液體的器具
移液器又稱移液槍，是一種用于定量轉(zhuǎn)移液體的器具。在進(jìn)行分析測(cè)試方面的研究時(shí)，一般采用移液器（pipette）移取少量或微量的液體。移液器根據(jù)原理可分為氣體活塞式移液器（Air-displacement pipette）和外置活塞式移液器（Positive-displacement pipette）。移液器也叫移液槍，是在一定量程范圍內(nèi)，將液體從原容器內(nèi)移取到另一容器內(nèi)的一種計(jì)量工具。被廣泛用于生物、化學(xué)等領(lǐng)域。
基本信息
| 中文名 | 移液器 |
| 外文名 | locomotive pipette |
| 用于 | 定量轉(zhuǎn)移液體 |
| 移液的方法 | 前進(jìn)移液法 反向移液法 |
結(jié)構(gòu)
移液器
工作原理
臨床常用的微量移液器的設(shè)計(jì)依據(jù)是胡克定律：即在一定限度內(nèi)彈簧伸展的長(zhǎng)力與彈力成正比，也就是移液器內(nèi)的液體體積與移液器內(nèi)的彈簧彈力成正比。
微量移液器加樣的物理學(xué)原理有兩種：使用空氣墊加樣和使用無(wú)空氣墊的活塞正移動(dòng)(positivedisplacement)加樣。這兩種不同原理的微量移液器有其不同的特定應(yīng)用范圍。
常見分類
- 根據(jù)工作原理可分為空氣置換移液器與正向置換移液器；
- 根據(jù)能夠同時(shí)安裝吸頭的數(shù)量可將其分為單通道移液器和多通道移液器；
- 根據(jù)刻度是否可調(diào)節(jié)可將其分為固定移液器和可調(diào)節(jié)式移液器；
- 根據(jù)調(diào)節(jié)刻度方式可將其分為手動(dòng)式移液器和電動(dòng)式移液器；
- 根據(jù)特殊用途可將其分為全消毒移液器、大容量移液器、瓶口移液器、連續(xù)注射移液器等。
臨床應(yīng)用
臨床診斷實(shí)驗(yàn)室，生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)室，藥學(xué)和化學(xué)實(shí)驗(yàn)室，環(huán)境實(shí)驗(yàn)室，食品實(shí)驗(yàn)室
注意事項(xiàng)
- 在調(diào)節(jié)移液器的過程中，轉(zhuǎn)動(dòng)旋鈕不可太快，也不能超出其最大或最小量程，否則易導(dǎo)致量不準(zhǔn)確，并且易卡住內(nèi)部機(jī)械裝置而損壞移液器。
- 在裝配吸頭的過程中，用移液器反復(fù)強(qiáng)烈撞擊吸頭反而會(huì)擰不緊，長(zhǎng)期如此操作，會(huì)導(dǎo)致移液器中零件松散，嚴(yán)重時(shí)會(huì)導(dǎo)致調(diào)節(jié)刻度的旋鈕卡住。
- 當(dāng)移液器吸頭里有液體時(shí)，切勿將移液器水平放置或倒置，以免液體倒流而腐蝕活塞彈簧。
- 對(duì)移液器進(jìn)行高溫消毒時(shí)，應(yīng)首先查閱所使用的移液器是否適合高溫消毒后在進(jìn)行處理。
選擇標(biāo)準(zhǔn)
- 性能：準(zhǔn)確性和重復(fù)性
- 耐用性/維護(hù)：移液器使用壽命長(zhǎng)，僅需要很少的維護(hù)或維護(hù)成本低
- 符合人體工程學(xué)原理： 手感舒適，吸排液操作力輕，避免重復(fù)性肌勞損，退吸頭力小
- 選擇具有廠商資質(zhì)售后服務(wù)的品牌。
選購(gòu)
1．產(chǎn)品性能，即移液器的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。對(duì)于絕大多數(shù)用戶而言，購(gòu)買之前檢測(cè)產(chǎn)品性能既有難度又無(wú)必要。因此，主要還是依據(jù)制造廠商提供的技術(shù)數(shù)據(jù)。但還是不要輕易相信賣家的口頭承諾，一定要查閱制造商提供的書面材料。
2．產(chǎn)品的可靠耐用這一方面，主要取決于移液器所用的材料。對(duì)于外殼，應(yīng)當(dāng)有較高的耐沖擊性、耐腐蝕性和較低的導(dǎo)熱性（如PVDF材質(zhì)）；對(duì)于活塞，目前市場(chǎng)上主要有不銹鋼、陶瓷和塑料三種材質(zhì)。不銹鋼機(jī)械性能好、壽命長(zhǎng)，只是不太適合用于強(qiáng)酸強(qiáng)堿的移液；陶瓷則有很高的耐腐蝕性，但機(jī)械性能較差。當(dāng)然，優(yōu)質(zhì)的材料往往意味著更高的價(jià)格，所以需要綜合考慮購(gòu)買價(jià)格和壽命的因素。
3．產(chǎn)品的人體工程學(xué)設(shè)計(jì)主要可以考慮以下幾點(diǎn)：
第一，完成一個(gè)移液循環(huán)拇指的移動(dòng)距離短，意味著舒適度更高；
第二，比較相同量程的移液器完成一次排液（一定要按到底）所需的拇指用力，這是影響舒適性的關(guān)鍵，用力越少意味著長(zhǎng)期使用造成手指損傷的風(fēng)險(xiǎn)越小；
第三，裝卸吸頭，同樣是越省力越好；
第四，移液器的重量適中，過重會(huì)增加手的負(fù)擔(dān)，但過輕也往往意味著材質(zhì)可能稍差；
第五，其它的輔助設(shè)計(jì)，如殼體的磨砂設(shè)計(jì)以及指鉤設(shè)計(jì)，有助于進(jìn)一步提高舒適性。
使用
量程的調(diào)節(jié)
在調(diào)節(jié)量程時(shí)，如果要從大體積調(diào)為小體積，則按照正常的調(diào)節(jié)方法，逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)旋鈕即可；但如果要從小體積調(diào)為大體積時(shí)，則可先順時(shí)針旋轉(zhuǎn)刻度旋鈕至超過量程的刻度，再回調(diào)至設(shè)定體積，這樣可以保證量取得最高精確度。
在該過程中，千萬(wàn)不要將按鈕旋出量程，否則會(huì)卡住內(nèi)部機(jī)械裝置而損壞了移液槍。
槍頭（吸液嘴）的裝配
在將槍頭（pipette tips）套上移液槍時(shí)，很多人會(huì)使勁地在槍頭盒子上敲幾下，這時(shí)錯(cuò)誤的做法，因?yàn)檫@樣會(huì)導(dǎo)致移液槍的內(nèi)部配件（如彈簧）因敲擊產(chǎn)生的瞬時(shí)撞擊力而變得松散，甚至?xí)?dǎo)致刻度調(diào)節(jié)旋鈕卡住。正確的方法是將移液槍（器）垂直插入槍頭中，稍微用力左右微微轉(zhuǎn)動(dòng)即可使其緊密結(jié)合。如果是多道（如8道或12道）移液槍，則可以將移液槍的第一道對(duì)準(zhǔn)第一個(gè)槍頭，然后傾斜地插入，往前后方向搖動(dòng)即可卡緊。槍頭卡緊的標(biāo)志是略為超過O型環(huán)，并可以看到連接部分形成清晰的密封圈。
移液的方法
移液之前，要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時(shí)，移液器保持豎直狀態(tài)，將槍頭插入液面下2－3毫米。在吸液之前，可以先吸放幾次液體以潤(rùn)濕吸液嘴（尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時(shí)）。這時(shí)可以采取兩種移液方法。
一是前進(jìn)移液法。用大拇指將按鈕按下至第一停點(diǎn)，然后慢慢松開按鈕回原點(diǎn)。接著將按鈕按至第一停點(diǎn)排出液體，稍停片刻繼續(xù)按按鈕至第二停點(diǎn)吹出殘余的液體。最后松開按鈕。
二是反向移液法。此法一般用于轉(zhuǎn)移高粘液體、生物活性液體、易起泡液體或極微量的液體，其原理就是先吸入多于設(shè)置量程的液體，轉(zhuǎn)移液體的時(shí)候不用吹出殘余的液體。先按下按鈕至第二停點(diǎn)，慢慢松開按鈕至原點(diǎn)。接著將按鈕按至第一停點(diǎn)排出設(shè)置好量程的液體，繼續(xù)保持按住按鈕位于第一停點(diǎn)（千萬(wàn)別再往下按），取下有殘留液體的槍頭，棄之。
移液器的正確放置
使用完畢，可以將其豎直掛在移液槍架上，但要小心別掉下來。當(dāng)移液器槍頭里有液體時(shí)，切勿將移液器水平放置或倒置，以免液體倒流腐蝕活塞彈簧。
維護(hù)保養(yǎng)
常見移液器
微量移液器
微量移液器是生物\化學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用的小容量移取液體的單道微量移液器。
由于蒸汽壓,密度,黏度不同,在吸取一些高黏度的物質(zhì)時(shí),如油脂,蛋白等,無(wú)法吸取。外置活塞移液器卻能勝任。
具有與單道空氣活塞式移液器一樣準(zhǔn)確的精度和誤差系數(shù)。外置活塞移液器
可以適用于高黏度液體，如蛋白，樹脂，最高黏度可達(dá)50,000mm2/s，最高密度可達(dá)13.6g/cm,如汞等；高蒸汽壓的液體，最高蒸汽壓可達(dá)500mbar，無(wú)論酒精還是一些碳?xì)浠衔?/a>，都能輕松移取。發(fā)泡性液體的移取也毫無(wú)問題。
瓶口移液器
根據(jù)型號(hào)不同,通常用于中等流量(0.5ml-100ml)的液體的運(yùn)輸,如酸,堿等,根據(jù)吸取的液體的性質(zhì)不同分為Dispensette III, Dispensette Organic 和Dispensette HF 。可以整體于121℃中消毒。
手動(dòng)連續(xù)移液器
可以迅速而方便地完成連續(xù)移液工作,可以輕松完成2ul-5000ul的試劑。一次吸液完成49次之多。對(duì)于粘稠，高密度液體和高蒸汽壓液體同樣可以準(zhǔn)確移取。適用 于Plastibrand PD吸頭，Combitips吸頭以及其他活塞式吸頭。
電子連續(xù)移液器
利用微處理器控制操作可達(dá)到自動(dòng)識(shí)別特定的PD-吸頭
移液體積控制范圍從1ul-50ml，移動(dòng)7.01ul，70.1ul等將毫無(wú)問題。
自動(dòng)分配，電子連續(xù)移液器可根據(jù)連續(xù)三次移液的平均間隔時(shí)間，然后進(jìn)行分液。(所需時(shí)間可自動(dòng)計(jì)算，不需人工計(jì)算和輸入)。
電子滴定器
常用于食品，制藥，石油化工等行業(yè)。
體積小，電池壽命長(zhǎng)，適合于狹小空間和遠(yuǎn)離電源的地方使用。操作簡(jiǎn)便，吸入試劑時(shí)，按“Fill”鍵，手輪向上旋動(dòng)，如開始滴定，按“Titr”鍵開始，手輪向下旋動(dòng)，即開始顯示滴定體積。數(shù)字顯示，減少了人為讀數(shù)和計(jì)算體積時(shí)所帶來的誤差。無(wú)需工具，用戶可自行校準(zhǔn)。
移液器校準(zhǔn)
清潔后的移液器需要校準(zhǔn)。移液器校準(zhǔn)時(shí)必須在室溫條件(25+/-2℃)下進(jìn)行。參照移液器的使用說明，不同刻度10000@0@0?ul必須分別進(jìn)行校準(zhǔn)。
- 將移液頭里的氣泡排除，選擇好需要校準(zhǔn)的刻度。
- 按加液鍵，將水加入空容器中稱重，記錄讀數(shù)。
- 按照國(guó)標(biāo)，移液器的校準(zhǔn)采用“三點(diǎn)測(cè)試（最大量程的100%，50%和10%），每點(diǎn)六次”的規(guī)則，而供應(yīng)商通常會(huì)選擇兩種規(guī)則：一是簡(jiǎn)易校準(zhǔn)，也就是兩點(diǎn)測(cè)試（最大量程的100%和10%），每點(diǎn)四次；二是嚴(yán)格校準(zhǔn)，也就是三點(diǎn)測(cè)試（最大量程的100%，50%和10%），每點(diǎn)十次。使用者根據(jù)自己的實(shí)際需求選擇一種規(guī)則完成測(cè)試后即進(jìn)入計(jì)算環(huán)節(jié)。（根據(jù)平均值與實(shí)際值間的絕對(duì)差值進(jìn)行調(diào)節(jié)，用工具來擰彈簧卡扣的松緊）
檢修常識(shí)
常見問題 | 原因 | 解決方法 |
移液器滲漏 | ●使用了不合適的吸頭 | ●用原廠的吸頭 |
●吸頭安裝不正確 | ●穩(wěn)妥安裝吸頭 | |
●吸頭圓錐磨損貨污染 | ●清洗安全圓錐 ●更換安全圓錐 | |
●活塞密封磨損或潤(rùn)滑劑不足 | ●清洗并給墊圈重上潤(rùn)滑劑 ●更換墊圈 | |
●儀器損壞 | ●送去維修 |
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使用方法
1.選擇合適的移液器
移取標(biāo)準(zhǔn)溶液(如水、緩沖液、稀釋的鹽溶液和酸堿溶液)時(shí)多使用空氣置換移液器，移取具有高揮發(fā)性、高黏稠度以及密度大于2.0g/cm的液體或者在臨床聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)測(cè)定中的加樣時(shí)使用正向置換移液器。如移取15ul的液體，最好選擇最大量程為20ul的移液器，選擇50ul及其以上量程的移液器都不夠準(zhǔn)確。
2.設(shè)定移液體積
調(diào)節(jié)移液器的移液體積控制旋鈕進(jìn)行移液量的設(shè)定。調(diào)節(jié)移液量時(shí)，應(yīng)視體積大小而旋轉(zhuǎn)刻度至超過設(shè)定體積的刻度，再回調(diào)至設(shè)定體積，以保證移取的最佳精確度。
3.裝配吸頭
使用單通道移液器時(shí)，將可調(diào)式移液器的嘴錐對(duì)準(zhǔn)吸頭管口，輕輕用力垂直下壓使之裝緊。使用多通道移液器時(shí)，將移液器的第一排對(duì)準(zhǔn)第一個(gè)管嘴，傾斜插入，前后稍微搖動(dòng)擰緊。
4.移液
保證移液器、吸頭和待移取液體處于同一溫度；然后用待移取吸液體潤(rùn)洗吸頭1-2次，尤其是黏稠的液體或密度與水不同的液體。移取液體時(shí)，將吸頭尖端垂直浸入液面以下2-3mm深度(嚴(yán)禁將吸頭全部插入溶液中),緩慢均勻地松開操作桿，待吸頭吸入溶液后靜置2-3秒，并斜貼在容器壁上淌走吸頭外壁多余的液體。
5. 移液器的放置
使用移液器完畢后，用大拇指按住吸頭推桿向下壓，安全退出吸頭后將其容量調(diào)到標(biāo)識(shí)的最大值，然后將移液器懸掛在專用的移液器架上；長(zhǎng)期不用時(shí)應(yīng)置于專用盒內(nèi) 。
移取方法
- 前進(jìn)移液法按下移液操作桿至第一停點(diǎn)位置，然后緩慢松開按鈕回原點(diǎn)；接著將移液操作桿按至第一停點(diǎn)位置排出液體，稍停片刻繼續(xù)將移液操作桿按至二停點(diǎn)位置排出殘余液體，最后緩慢松開移液操作桿。
- 反向移液法先按下按鈕至第二停點(diǎn)位置，慢慢松開移液操作桿回原點(diǎn)，排出液體時(shí)將移液操作桿按至第一停點(diǎn)位置排出設(shè)置好體積的液體，繼續(xù)保持按住移液操作桿位于第一停點(diǎn)位置取下有殘留液體的吸頭而棄之。
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作者
