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磷酸緩沖液（用于生物化學研究中的溶液）

次瀏覽 | 更新時間：2023-05-22

來源：網(wǎng)絡(luò)整理

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磷酸緩沖液

用于生物化學研究中的溶液

磷酸緩沖液（PB，Phosphate Buffer），是生物化學研究中使用最為廣泛的一種緩沖液，通常使用的有磷酸鈉緩沖液（NaH2PO4&Na2HPO4）和磷酸鉀緩沖液（K2HPO4&KH2PO4)，由于它們有二級解離，緩沖的pH值范圍很廣。

基本信息

中文名	磷酸緩沖液
外文名	Phosphate Buffer
磷酸緩沖液	PH5.7--8.0
成分	NaH2PO4&Na2HPO4

主要作用

PB(Phosphate Buffered)，主要用于化學實驗。簡稱：PB或者PB緩沖液

配制方法

0.2M磷酸緩沖液

磷酸緩沖液PH5.7--8.0(0.2M)

甲液：

NaH2PO4·2H2O：Mr=156.03，0.2mol/L溶液為31.21g/L，

NaH2PO4·H2O：Mr=138.01，0.2mol/L溶液為27.6g/L。

乙液：

Na2HPO4·2H2O：Mr=178.05，0.2mol/L溶液為35.61g/L，

Na2HPO4·7H2O：Mr=268.13，0.2mol/L溶液為53.624 g/L ，

Na2HPO4·12H2O：Mr=358.22，0.2mol/L溶液為71.64g/L。

磷酸緩沖液PH5.7--8.0(0.2M)

PH	甲液X(ml)	乙液Y(ml)	PH	甲液X(ml)	乙液Y(ml)
5.7	93.5	6.5	6.9	45	55
5.8	92	8	7	39	61
5.9	90	10	7.1	33	67
6	87.7	12.3	7.2	28	72
6.1	85	15	7.3	23	77

展開表格

根據(jù)要求的PH值，取X毫升甲液與Y毫升乙液，混合均勻即得.

1/15M 磷酸緩沖液

磷酸緩沖液PH4.49--9.18(1/15M)

PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml) PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml)

4.4 90 10 6.98 64

4.9 40.1 9.9 7.71 7 3

5.29 0.25 9.75 7.58 8 2

5.59 0.5 9.5 7.75 9 1

5.91 19 8.04 9.5 0.5

6.24 2 8 8.2 9.7 0.3

6.47 3 7 8.54 9.75 0.25

6.64 4 6 8.68 9.9 0.1

6.81 5 5 9.18 10 0

乙液：一水磷酸二氫鈉,1/15M溶液含9.2g/L

甲液：二水磷酸氫二鈉,1/15M溶液含11.864g/L

根據(jù)要求的PH值，取X毫升甲液與Y毫升乙液，混合均勻即得.

緩沖范圍

磷酸緩沖液的緩沖pH值范圍非常廣泛，可配置各種pH值的酸性、堿性和中性緩沖液，配制酸性緩沖液可直接用NaH2PO4或KH2PO4，pH范圍在1-5；堿性緩沖液可直接用Na2HPO4或K2HPO4，pH范圍在9-12；中性緩沖液則用等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，pH在5.5-8.5。

濃度計算

通常所說的磷酸緩沖液的濃度是指溶液中含有的所有的磷酸根離子的濃度，而不是鈉離子（Na+）或者鉀離子（K+）的濃度。正是因為如此，在配制中性緩沖液時，用等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，并不影響磷酸根離子的濃度，所得的緩沖液濃度仍是等濃度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等濃度的KH2PO4和K2HPO4溶液原來的濃度，但是緩沖液中的鈉離子（Na+）或者鉀離子（K+）的濃度已經(jīng)發(fā)生變化。

優(yōu)缺點

磷酸緩沖液的優(yōu)點：（1）易配制各種濃度的緩沖液；（2）適用的pH值范圍寬，可配置各種pH值的緩沖液；（3）pH受溫度影響較小；（4）緩沖能力強，緩沖液被稀釋后pH變化小。

磷酸緩沖液的缺點：（1）易與常見的鈣離子Ca2+、Mg2+及一些重金屬離子締合形成沉淀；（2）會抑制某些生化反應(yīng)過程，如抑制某些酶的催化過程等。

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