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超氧化物歧化酶
生物體內存在的一種抗氧化金屬酶
超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）是生物體系中抗氧化酶系的重要組成成員，廣泛分布在微生物、植物和動物體內。
基本信息
| 中文名 | 超氧化物歧化酶 |
| 別名 | SOD |
| 發(fā)現(xiàn)時間 | 1969年 |
| 應用領域 | 生化制藥 |
| 作用 | 能夠催化超氧陰離子自由基歧化生成氧和過氧化氫，在機體氧化與抗氧化平衡中起到至關重要的作用 |
| 外文名 | Superoxide Dismutase |
收起
基本簡介
概念
反應機理
測定方法
超氧化物歧化酶活性的主要測定方法有直接法、鄰苯三酚自氧化法、細胞色素C還原法、化學發(fā)光法及熒光動力學法等。近年來又建立了多種新方法，如免疫學方法、簡易凝膠過濾擴散法、極譜氧電極法、微量測活方法等。
1.直接法原理是根據(jù)O2或產(chǎn)生O2的物質本身的性質測定O2的歧化量，從而確定SOD的活性。經(jīng)典的直接法包括：脈沖輻射分解法、電子順磁共振波法（EPR）、核磁共振法。由于所需的儀器設備價格昂貴，一般較少應用。
2.鄰苯三酚自氧化法：原理是基于經(jīng)典的分光光度法，在堿性條件下，鄰苯三酚自氧化成紅桔酚，用紫外-可見光譜跟蹤波長為325nm、420nm或650nm（經(jīng)典為420nm），同時產(chǎn)生O2，SOD催化O2發(fā)生歧化反應從而抑制鄰苯三酚的自氧化，樣品對鄰苯三酚自氧化速率的抑制率，可反映樣品中的SOD含量。本法具有特異性強，所需樣本量少（僅50μl），操作快速簡單，重復性好，靈敏度高，試劑簡單等優(yōu)點。
3.細胞色素C還原法：原理是黃嘌呤-黃嘌呤氧化酶體系中產(chǎn)生的O2使一定量的氧化型細胞色素C還原為還原型細胞色素C，后者在550nm有最大光吸收。在SOD存在時，由于一部分O2被SOD催化而歧化，O2還原細胞色素C的反應速度則相應減少，即其反應受到抑制。將抑制反應的百分數(shù)與SOD濃度作圖可得到抑制曲線，由此計算樣品中SOD活性。本法是間接法中的經(jīng)典方法，但本法靈敏度較低。
4.化學發(fā)光法：原理是黃嘌呤氧化酶在有氧條件下，催化底物黃嘌呤或次黃嘌呤發(fā)生氧化反應生成尿酸，同時產(chǎn)生O2。后者可與化學發(fā)光劑魯米諾反應，使其產(chǎn)生激發(fā)。SOD能清除O2從而抑制魯米諾的化學發(fā)光。本法可應用于SOD的微量測定，不僅靈敏度高，簡便易行，而且特異性與準確性至少與細胞色素C還原法類似。
5.免疫學方法：其測定的是SOD活性，免疫學方法則可測定樣品中SOD的質量，因此特異性較好，是較理想的測定SOD方法，免疫法有放射免疫法、化學發(fā)光免疫分析法、ELISA法等。但其缺陷是只能測定抗體相應的抗原，對于檢測不同種類的SOD，則須制備相應的特異性抗體，手續(xù)繁瑣。
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